水樣中汞離子（Hg²⁺）濃度檢測試劑盒說明書

                                               微量法100T/96S

注    意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義：

Hg²⁺是水體中重要有毒重金屬離子，易被生物體吸收并且積累，能夠通過食物鏈進(jìn)一步傳遞，從而造成傷害。典型的水俁病就是汞中毒的一種。

測定原理：

水樣經(jīng)消化后，在酸性環(huán)境中，Hg²⁺能與二硫腙生成橙色絡(luò)合物，溶于三氯jia烷，在490nm測定吸光度，即可計算Hg²⁺含量。

自備儀器和用品：

恒溫水浴鍋、可調(diào)式移液槍、濃硫酸、三氯jiua烷、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體30mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑二：液體5mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體7mL×1瓶，4℃保存。

試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。加三氯jia烷（自備）35 mL充分溶解。

標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1瓶，4 nmol/mL Hg²⁺，室溫保存。

水樣中汞離子檢測：

1. 消化

（1）水樣消化：取1.5mL EP管，依次加入300μL水樣，30 μL濃硫酸（自備），240μL試劑一，混勻后蓋緊，置于40℃水浴中消化24 h。

（2） 標(biāo)準(zhǔn)品消化：取1.5mL EP管，依次加入30μL標(biāo)準(zhǔn)品，270μL蒸餾水，30 μL濃硫酸，240μL試劑一，混勻后蓋緊，置于40℃水浴中消化24 h。

2. 取出各管，室溫放置約20min，使之冷卻。然后加入48μL試劑二，蓋緊后充分震蕩，直到無色。開蓋靜置30min，期間搖蕩數(shù)次，使其中氣體溢出。

3. 加入300μL試劑五，加入60 μL試劑四，充分震蕩后靜置分層。

4. 靜置分層后，取移液槍，調(diào)節(jié)刻度到210μL，排氣后沿管壁小心插入下層，吸取210μL下層液體，加入微量石英比色皿/96孔板，于490nm處比色，記錄各管吸光值。

注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

汞離子濃度計算：

Hg²⁺（nmol/L）= C標(biāo)準(zhǔn)品÷標(biāo)準(zhǔn)品稀釋倍數(shù)×(A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管)×V總

=400×(A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管)

C標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品濃度，4 nmol/mL；標(biāo)準(zhǔn)品稀釋倍數(shù)：（30μL標(biāo)準(zhǔn)品+270μL蒸餾水）÷30μL標(biāo)準(zhǔn)品=10； V總：1L=1000 mL。

注意事項：

1. 水樣中1000μg/L銅離子，20μg/L銀離子，10μg/L金離子，5μg/L鉑離子對測定無干擾。

2. 測定過程中應(yīng)注意安全，佩戴口罩和手套，以免吸入或沾到有毒及危險試劑。

3. Z低檢出限為0.1μmol/L。